电转染的细胞要求
1 .电穿孔实验时的细胞准备
对于entranster-E电转染试剂,在电穿孔前1-3天进行细胞传代,使其在电穿孔实验时处于指数生长期,达到最佳的细胞融合度。对于生长缓慢或原代细胞,可能不需要此步骤。
2 . 电穿孔实验时的细胞密度
确定每种细胞类型的最佳细胞密度,以使电穿孔效率最大化。在含电转试剂的终体系中,电穿孔时的细胞密度一般在1-10×10*6细胞/ml范围内。对于悬浮细胞,最好是接近10×10*6细胞/ml的高细胞密度。对于贴壁细胞,建议的细胞密度为1-5×10*6细胞/ml。对于0.2 cm和0.4 cm的电转杯,每个电转杯的最终电转染液的体积分别为0.1 ml和0.25 ml。
3. 电转染后的细胞孵育时间
确定每种细胞类型和实验的最佳电转染后的孵育时间。可测试不同的细胞孵育时间(例如12-72小时)。最佳孵育时间一般为4-48小时。
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