Morpholino

Morpholino 原理

-Morpholino（MO）全称Morpholino Anti-sense oligos，是由美国Gene Tools公司研发的第三代反义寡核苷酸。
-Morpholino是把核苷酸上的五碳糖环用一个吗啉环（morpholino）取代，同时对原有的磷酸基团也做了改变。使得这样一个DNA分子类似物可以通过碱基配对的方式同RNA和DNA单链结合，但是由于结构的改变，使得整个分子不带有任何电荷，因此无法被任何酶识别（包括DNase和RNase），使得这类物质在细胞内有着极强的稳定性。

Morpholino 作用

-Morpholino一般包含25个碱基，也是基于反义技术与目标mRNA结合。通过与不同阶段的mRNA结合，阻断目标基因的表达，包括mRNA剪切阶段（Splicing）和翻译阶段（ATG）。

剪切阶段（Splicing）-- 结合在pre-mRNA中外显子和内含子连接区域，通过阻断mRNA剪切来降低目的基因表达的splice MO

阻断方式：空间位阻
结合对象：Pre-mRNA
机理：干扰Pre-mRNA的剪切，导致生成的mRNA缺失目标外显子
阻断的靶区域：Pre-mRNA的“外显子+内含子”交界处

翻译阶段（ATG）-- 结合在mRNA的ORF前端（起始密码子附近）阻止翻译的ATG MO

阻断方式：空间位阻
结合对象：成熟mRNA
机理：阻断核糖体前体（Initiation Complex）的组装
阻断的靶区域：AUG（起始密码子）开始的25个碱基以及5’UTR