动物细胞培养方法

体外培养的动物细胞可分为原代细胞与传代细胞。原代细胞是指从机体取出后立即培养的细胞，进行传代培养后的细胞即称为传代细胞。

任何动物细胞的培养均需从原代细胞培养开始。动物很多组织的细胞，如幼年动物的肾、肺、卵巢、精巢、肌肉及肿瘤等组织的细胞较易培养，而神经细胞等则较难培养。

原代细胞培养步骤如下：首先取出健康动物的组织块，剪碎，用浓度与活性适中的胰酶或胶原酶与EDTA（螯合剂）等将细胞连接处消化分散，给予良好的营养液与无菌的培养环境（接近体温与体内pH），在培养中进行静止或慢速转动培养。但不论用何种培养液一般都要加一定量的小牛（或胎牛）血清，这样细胞才能很好地贴壁生长与分裂。

动物细胞培养方法

1、贴壁培养

贴壁培养是指细胞贴附在某种基质上进行增殖的培养方法，适用于一切贴壁细胞。由于贴壁细胞具有贴壁要求，提高细胞密度就是使反应体系中比表面积最大化的有效方法。传统的贴壁细胞培养方法包括转瓶、多层平板培养和搅拌式微载体培养。转瓶和多层平板培养由于不能有效监控细胞的生长, 操作比较繁琐, 贴附面积具有限制性, 传质和传氧差, 在实际生产使用中受到极大的限制。目前, 贴壁细胞的微载体培养在细胞生产中得到广泛的应用。

2、悬浮培养

悬浮培养是指细胞自由地悬浮于培养液内生长增殖的一种培养方法。悬浮生长的细胞其培养和传代都十分简便, 培养时只需将采集到的活体动物组织经分散、过滤、纯化和漂洗后, 按一定密度接种于适宜培养液中, 置于特定的培养条件下即可良好的生长。传代时也无需 再分散, 只需按比例稀释后即可继续培养。采用该方法培养的细胞增殖快、产量高, 且培养过程简单, 是大规模培养动物细胞的理想模式之一。

3、大规模培养

动物细胞大规模培养技术是在贴壁培养和悬浮培养的基础上, 融合了固定化细胞、流式细胞术、填充床、生物反应器技术以及人工灌流和温和搅拌系统等技术而发展起来的, 目前已广泛用于生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单克隆抗体等, 已成为医药生物高技术产业的重要组成部分。目前比较成熟且有应用价值的大规模培养方法主要包括: 中空纤维法、微囊法和微载体法等。