通过抑制NF-κB信号通路改善实验性结肠炎

 UBE2W Improves the Experimental Colitis byInhibiting the NF-κB Signaling Pathway UBE2W通过抑制NF-κB信号通路改善实验性结肠炎

背景：NF-κB信号级联调节免疫反应，在肿瘤发展过程中经常失调。UBE2W是一种新型的I型泛素偶联酶（E2），其生物学功能尚不清楚。

目的：本研究旨在研究UBE2W是否调节NF-κB信号通路并参与实验性结肠炎的进展。

方法：在细胞水平上，使用双荧光素酶报告基因测定法测定UBE2W对NF-κB转录活性的影响。分别通过蛋白质印迹和免疫荧光分析测定UBE2W对NF-κB通路激活和p65进入细胞核的影响。此外，通过向UBE2W过表达、UBE2W敲低和对照小鼠施用2.5%右旋糖酐硫酸钠（DSS）/水来建立结肠炎模型。检查体重、粪便稠度、结肠长度和临床严重程度。分别通过qRT-PCR和Western印迹测定结肠组织中促炎细胞因子的表达和p65和IκB的磷酸化。

结果：UBE2W抑制TNFα诱导的NF-κB转录活性，减弱IκB和p65的磷酸化，下调TNFα和IL-8的表达，阻断p65进入细胞核。在DSS诱导的结肠炎模型中，与对照小鼠相比，UBE2W敲低小鼠的体重减轻、腹泻和粘膜损伤更严重。此外，在UBE2W敲低小鼠中，IκB和p65的磷酸化以及促炎介质如TNFα、IL-6的表达显著增加。然而，这些变化在UBE2W过表达小鼠中被完全逆转。

其中体内RNA转染是通过Entranster invivo –RNA来实现。