UMNSAH/DF-1(鸡胚成纤维细胞)培养教程

细胞名称：UMNSAH/DF-1(鸡胚成纤维细胞)

细胞别称：UMNSAH-DF-1；UMNSAH-DF1；UMNSAH-DF1；UMNSAH/DF#1；DF-1；DF1；DouglasFoster-1

细胞货号：SNL-006

生长特性：贴壁培养条件：DMEM+10%FBS+1%P/S

培养环境：39℃（38-40℃）；5%CO2；饱和湿度

细胞简介：UMNSAH/DF-1细胞是起源于10日龄的ELL-0鸡蛋的鸡成纤维细胞株，自发永生化。分离的原代鸡胚成纤维细胞在培养液中培养，在培养过程中保持细胞在30%到60%密度，传代直到衰老，不衰老的克隆进行鉴定并传代不少于30次。在软琼脂上没有观察到克隆增殖，说明UMNSAH/DF-1细胞是永生化而没有转化。UMNSAH/DF-1细胞可作为病毒增殖、重组蛋白表达和重组病毒生产的基质。

▲细胞正常生长形态照片

DF-1细胞培养注意事项

1.培养温度DF-1细胞最适的生长温度为39℃。也可以在37℃传代培养一段时间，但传代数次后状态会有变化。37℃培养条件下，细胞的形态和生长速度会发生改变，可能会出现较多的空泡，换回39℃培养可以恢复。

2.控制接种密度DF-1细胞接种密度低时生长缓慢，接种密度不可过低，推荐传代比例1：2-1：4，具体情况视细胞生长速度及密度决定。（注意T25培养瓶底面积为25cm2，10cm培养皿底面积是55cm2。一个T25传两个10cm皿约等于1：4传代，而非1：2）。

3.控制消化时间DF-1细胞贴壁较弱，消化时间较短，注意控制消化时间（消化步骤见下文传代攻略）。另外，在遇到快递运输震荡、低温、室温静置太长时间、添加的培养基或其他试剂过冷等情况时可能会出现细胞回缩变粗变短甚至脱落的现象，及时放回培养箱静置培养后可恢复正常。平时注意传代换液前将培养基、PBS等试剂充分预热，不要把细胞放在室温太长时间。

4.对血清要求高建议使用高品质的、并确认过培养效果的专用培养基及血清，血清品质对该细胞生长影响甚大。