引物相关知识
引物一般分为干粉引物和液体引物
1. 引物贮存液
引物合成回来后,可以依据报告单上的推荐用量,添加相应体积的TE buffer构成100uM的贮存液。引物保存在高浓度的状况下比较稳定
(μM是浓度单位,百万分比浓度,指用溶质质量占全部溶液质量的百万分比来表示的浓度,也称百万分比浓度。1μM=1μmol/L=1pmol/μL。)
2. 引物工作液
3. 储备液一般是100uM,也有稀释成10uM的。反正做PCR的最终其工作液终浓度范围是0.2μmol/L左右。我一般把引物稀释成10uM,25微升PCR体系一般加0.4-1.0微升的引物。
引物稀释:
一般生产厂家出厂时都会注明 1 OD相当于多少umol 的量。
例如:引物DNA合成报告单上标有1OD≈0.0035umol,包装量是1 OD/管。如果您希望将引物浓度定为 100umol/L,那么只需用35ul无核酸酶的双蒸水将1OD的引物干粉溶解即可。
0.0035umol x 10000 = 35ul
换算:
摩尔(mole),符号为mol,每1摩尔任何物质(微观物质,如分子,原子等)含有6.02×10²³个微粒,比如:1mol的碳原子含6.02×10²³个碳原子,质量为12克;1mol的硫原子含6.02×10²³个硫原子,质量为32克。就好比十颗青菜和十颗鸡毛菜的关系,都是十颗,但是重量不同,体积不同,物体属性也不相同。
1摩尔(mmol)=1000毫摩尔(mmol)
1毫摩尔(mmol)=1000微摩尔(μmol)
1微摩尔(μmol) = 1000纳摩尔(nmol)
1纳摩尔(nmol)=1000皮摩尔(pmol)
1皮摩尔(pmol)=1000飞摩尔(fmol)
参考:常见激素单位换算
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