A549、HT-29、CAL-27、MDA-MB-231细胞培养技术分享

影响影子：IF:16.6 

发表期刊:Nature Communications 

Doi: 10.1038/s41467-022-28213-y

原文标题：Electron transfer-triggered imaging of EGFR signaling activity。  

背景：生物过程中的能量转移是通过电子和质子的转移来实现的,在肿瘤发展进程中，与正常细胞相比，肿瘤细胞实现了极其活跃的电子转移，以支持其增殖、分化和迁移。如果能够通过监测与肿瘤增殖相关信号通路的电子转移，则有可能在此基础上进行治疗干预。 

方法：研究了用于电子转移触发成像的ETTE纳米探针在肿瘤治疗过程中的动态监测。通过纳米探针设计，免疫荧光，western蛋白印迹等方法探究了使用ETTEE纳米探针作为显像剂，在A549肺癌细胞中对EGFR信号通路活性进行成像的效果。通过免疫组化，小鼠活体成像等方法并利用肺癌小鼠模型评估了ETTE纳米探针在肿瘤治疗过程中对EGFR信号通路活性的动态监测能力。

结果：我们设计的ETTE纳米探针，通过使用二茂铁-DNA聚合物链，在信号通路激活过程中将转移的电子改变为光信号，可以在时间和空间尺度上进行活体成像。进一步在A549细胞中使用ETTE纳米探针对EGFR信号通路进行成像验证了EGFR激活水平较高的细胞可以产生更强的信号，即在细胞水平上，EGFR相关信号通路的激活可以通过ETTE纳米成像探针实现可视化。基于肿瘤治疗过程中EGFR活性下降我们进一步利用ETTE纳米探针对肿瘤治疗过程进行动态监测，结果显示治疗组肿瘤部位有更弱的信号。

结论：综上所述，我们的研究表明，ETTE纳米探针可以在肿瘤治疗过程中实现对EGFR信号通路活性的动态监测，并有望在后续的治疗决策和预后中发挥关键作用。

文章引用：

Cell Culture

A549 cells: A549 cells derived from two different sources, American Type Culture Collection (ATCC) and China Center for Type Culture Collection (CCTCC). The A549 cells were maintained in DMEM high glucose (Gibco™, USA) with 10% fetal bovine serum (Zeta life, USA) and 1% penicillin/streptomycin (New Cell & Molecular Biotech, Co., Ltd).

HT-29 cells: HT-29 cells were derived from CCTCC. The HT-29 cells were maintained in DMEM high glucose (Gibco™, USA) with 10% fetal bovine serum (Zeta life, USA) and 1% penicillin/streptomycin (New Cell & Molecular Biotech, Co., Ltd).

CAL-27 cells: CAL-27 cells were derived from CCTCC. The CAL-27 cells were maintained in DMEM high glucose (Gibco™, USA) with 10% fetal bovine serum (Zeta life, USA) and 1% penicillin/streptomycin (New Cell & Molecular Biotech, Co., Ltd).

MDA-MB-231 cells: MDA-MB-231 cells were derived from CCTCC. The MDA-MB-231 cells were maintained in DMEM high glucose (Gibco™, USA) with 10% fetal bovine serum (Zeta life, USA).

文章培养细胞方法总结A549、HT-29、CAL-27、MDA-MB-231细胞均使用ZETA life含有10%血清及1%青/链霉素的高糖DMEM培养基培养，MDA-MB-231细胞使用含有10%血清的高糖DMEM培养基培养。上述细胞正常培养后，提取细胞蛋白，通过Western blot检测EGFR表达水平。同时，培养的A549细胞移植到小鼠体内，并通过活体成像实时观察肿瘤生长情况。结果表明，使用ZETA life胎牛血清培养的A549细胞移植后，能够形成稳定的小鼠肿瘤模型。（备注：A549：人非小细胞肺癌细胞；HT-29 ：人结肠癌细胞；CAL-27：人舌鳞癌细胞；MDA-MB-231：人乳腺癌细胞。）

引用产品

胎牛血清fetal bovine serum (Zeta life, USA) ；

热门产品Z7010FBS-500,胎牛血清（澳洲血源）；Z7181FBS-500,胎牛血清（乌拉圭血源）；Z7186FBS-500,胎牛血清（法国血源）；Z7185FBS-500,胎牛血清（巴西血源）；Z7187FBS-500,胎牛血清（墨西哥血源）；Z7180FBS-500,胎牛血清（超低内毒素血清）；AD600150，Advanced DNA RNA 细胞转染试剂；AV500150，小动物活体转染试剂Advanced DNA RNA；CE80100T，无血清细胞冻存液 Plus ZT10002-5ml，支原体去除试剂(MRA)ZETA life FBS（胎牛血清）简介：美国ZETA life公司成立于1989年，是国际无血清细胞培养基DMEM/F12主要完成人，有几十年的胎牛血清、无血清细胞培养基、以及干细胞、免疫细胞及肿瘤细胞等多种不同类型哺乳动物细胞的无血清培养液生产经验；ZETA life也是目前世界胎牛血清、无血清培养基最大的OEM供应商之一；每批血清均有完整的血源证明文件、兽医师检验证明及品质测试报告；ZETA life胎牛血清在100级的无菌间采用全自动方式制造生产，具有良好的可再现性及可追溯性。