硫乙醇酸盐流体培养基的使用注意事项

硫乙醇酸盐流体培养基(Fluid Thioglycollate Medium)是 Brewer 于1940 年发明,自20 世纪50 年代起,国内外药典陆续将其收录,用于药品的无菌检查。1977 年版《中国药典》无菌检查项下,将硫乙醇酸盐流体培养基作为选择性培养基列入,并注明用于汞砷类化合物的无菌检查。1985 年版《中国药典》,硫乙醇酸盐流体培养基收载于无菌检查项下,培养基的名称为“需氧、厌气菌培养基”。在此后的各版《中国药典》及《中国生物制品规程》,均收载硫乙醇酸盐流体培养基用于无菌检查。

虽然硫乙醇酸盐流体培养基存在一定的局限性,其不能使所有的梭状芽孢杆菌生长,但之所以能够沿用至今,是因为其具有不可替代的巨大优势。即其能在普通有氧环境下提供厌氧条件,使需氧菌和厌氧菌均能够生长良好,并易于观察结果,这提供了一般实验室难以达到的厌氧培养条件。

配制硫乙醇酸盐流体培养基时,除按照药典规定的方法制作外,还需要注意以下问题:

(1)硫乙醇酸盐流体培养基有0.075 %的琼脂,在灭菌后,培养基应呈现无浑浊状态,如果放置一段时间,出现轻微浑浊,尤其是放入冰箱后,浑浊现象更加明显。浑浊程度一方面可能与培养基用的琼脂质量有关,另一方面也可能与灭菌是否彻底有关,具体情况应具体分析。随着目前无菌检查对培养基的质量要求越来越高,包括北京三药在内的国内几家培养基供应商在这方面的研究有质的突破,不仅澄明度高,氧化层也能维持稳定。

(2)如果存在大体积配制,然后分装到小的容器中的情况,应注意分装的均一性。

(3)培养基在灭菌后至使用过程中取放应避免摇晃,以免培养基因振动而进入氧气,影响培养基的使用,接种操作应动作迅速、敏捷。

(4)在接种前,如果氧化层(粉红色)的高度超过培养基深度的1/3,须经100℃水浴加热至粉红色消失(不超过20 min),迅速冷却,只限加热一次,并防止被污染。

(5)硫乙醇酸盐流体培养基含有较多的还原性物质,在灭菌过程中,应注意在无菌保证的前提下,避免过热,以防止PH降低到6.9以下的可能。

(6)供试品加入到硫乙醇酸盐流体培养基中之后,可能出现琼脂析出的情况,这个应根据调查情况具体分析,并采取有效措施。

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作者:倾城
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来源:TechFM
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