直播答疑 | 细胞形态问题盘点
Q1.悬浮细胞也要用TC处理的培养瓶吗?
A悬浮细胞对TC处理无要求,培养瓶无论是否TC处理都可以培养悬浮细胞。
Q2.细胞内出现颗粒状物质是什么情况?
A细胞内的黑色颗粒是细胞外分泌泡及细胞器折光,这个属于细胞自身特性,无法清除也无法改变,大部分细胞都会有这种现象,只是不同细胞颗粒多少有区别,细胞培养体系不适应、营养缺乏、渗透压异常等均可能导致细胞内颗粒增加,建议使用合适的培养条件。
Q3.细胞上粘了一层圆的细胞,也是分裂细胞吗?
A有可能是分裂相的细胞,因细胞汇合度已经到达100%,没有空间生长,故呈现圆形。也有可能是该细胞本身形态为混合型,存在部分圆形细胞。
Q4.感觉细胞形态变了,但是长得还可以,还能继续做实验嘛?
A如果是更换培养条件(如培养基、血清等)导致细胞有少许改变,但生长速度尚可,一般细胞功能是没有改变的,可以继续实验。若细胞形态发生较大变化,生长速度与之前相似,则需要考虑细胞是否为错误细胞或者交叉污染,可通过STR鉴定等方法来确认。
Q5.怎么判断细胞状态好不好?
A细胞形态和生长速度正常可以认为细胞状态是好的。
Q6.Raw264.7细胞一直分化怎么办?
A该细胞是对环境极其敏感的,首先需要排查是否有细菌、支原体等潜在污染刺激细胞分化;血清需要使用高质量低内毒素的;培养时注意规范操作,避免细胞受损而自发分化;传代时不建议使用胰酶,胰酶将刺激细胞分化;建议控制在1-2天传代一次,超过3天不传代细胞容易分化。具体操作可查看推文《细胞攻略|RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)培养教程》
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