小分子化合物使用的正确打开方式!
我们时常会遇到小伙伴咨询关于小分子化合物 (抑制剂,激动剂等) 的溶解,储存等问题,今日我们就详细解答一下!
关于小分子化合物的储存
产品储存
化学性质稳定产品:大多数小分子化合物在固体状态下较为稳定。例如,在-20°C下可以储存3年,在4°C下可以储存2年。而在储备液状态下,建议的储存条件为-80°C下储存半年,-20°C下储存1个月。
光敏感产品:这类产品需要进行避光保存,以防止其受到光照的影响而变质。可以使用棕色瓶分装或者使用锡箔纸包裹进行避光。
易吸潮产品:对于这类产品,需要进行防潮处理,以防止其吸收空气中的水分而变质。通常可以通过使用封口膜进行封口来实现防潮。如果产品已经溶解,那么通常不需要担心吸潮问题。
易氧化产品:这类产品需要在惰性条件下储存,或者通过充氮保存来防止其氧化。
▐ 小分子化合物的溶解和稀释
在产品运输过程中,粉末或溶液可能会附着到管壁或管盖上。在溶解前使用离心机低速离心,可减少产品的损失。
当小分子化合物用于细胞实验
▐ 溶剂选择
万能溶剂 DMSO : DMSO是一种常用的溶剂,对于大多数小分子化合物具有良好的溶解性。然而,其浓度需要控制在一定范围内,一般建议终浓度在0.1%以下,以避免对细胞产生毒性。某些细胞可能对DMSO不太敏感,能够承受更高的浓度,但即便如此,也应谨慎使用。
其他有机溶剂:除了DMSO外,还可以考虑使用其他有机溶剂,如DMF(N,N-二甲基甲酰胺)、无水乙醇等。这些溶剂在某些情况下可能更适合用于溶解特定的小分子化合物。但是,使用这些溶剂时也需要注意其可能对细胞产生的毒性。
水溶性溶剂:有些小分子类产品只能在水中溶解 (例如磷酸氯喹在水中最大溶解度是,但是 DMSO 不溶解,但是等效游离形式只能在 DMSO 中溶解,水中完全不溶),用 DD 水配置储存液之后,在进行细胞实验稀释到工作液之后,需要进行过滤除菌(不建议过滤水溶的储备液,储备液过滤会有大的损耗)
▐ 药物溶解
溶解度确定:首先确定好具体溶解度,如下产品,在 DMSO 中的最大溶解度是 125 mg/mL ; 在无水乙醇中的最大溶解度为 50 mg/mL。
Need ultrasonic:指要达到最大溶解度需要超声辅助溶解 (建议使用超声清洗仪器,使用频次 20-40 kHz); 所需溶解度远低于最大溶解度,吹打,涡旋辅助溶解即可。
不同的辅助溶解方式
溶解过程:细胞实验,如果选择有机溶剂进行溶解,建议先配置最大给药浓度的 1000x 或者 500x 储存液。将小分子化合物加入选定的溶剂中,通过搅拌或振荡使其充分溶解。对于难溶性药物,可以采用加热、超声等方法促进其溶解。在溶解过程中,应注意避免产生颗粒沉淀,因为这可能会影响药物的生物利用度和细胞实验结果。
当小分子化合物用于动物实验
▐ 溶剂选择
易溶于水的产品:对于水溶性好的药物,水是最常用的溶剂。但在某些情况下,水可能不足以溶解药物,此时需要选择其他溶剂或助溶剂。
生理盐水(PBS):生理盐水是另一种常用的溶剂,尤其在需要模拟体内环境时。它通常用于稀释药物或作为药物的载体。
有机溶剂:对于水溶性差的药物,可能需要使用有机溶剂,如二甲基亚砜(DMSO)、二甲基甲酰胺(DMF)、乙醇、丙二醇(PG)和聚乙二醇(PEG)等。这些溶剂可以提高药物的溶解性,但需要注意它们在动物体内的毒性和代谢。
助溶剂:当药物在水或有机溶剂中的溶解度有限时,可以使用助溶剂来提高药物的溶解性。例如,环糊精(如羟丙基-β-环糊精和磺丁基-β-环糊精)可以与疏水性药物分子形成水溶性配体药物复合体,从而提高药物的溶解度。
小贴士:200 uL 给药体系,DMSO 占比 10%:DMSO 在给药体系里占有 20 uL,正常小鼠可耐受,但有免疫缺陷的小鼠,建议 DMSO 的占比尽量不超过 2% 。
不同类型的免疫缺陷鼠
AmBeed推荐小分子激动剂/抑制剂:
货号产品名称规格A248150SB 203580(p38 MAPK抑制剂)100mgA155219SP600125(JNK抑制剂)50mgA282482PD 98059(MEK抑制剂)50mgA156234Brefeldin A(蛋白转运抑制剂)25mgA107077BAY 11-7082(IKK抑制剂)25mgA656002Rapamycin(mTOR抑制剂)100mgA1458723-Methyladenine(自噬抑制剂)500mgA101744Y-27632 2HCl(ROCK1抑制剂)5mgA145112Erastin(铁死亡诱导剂)50mgA767839PMSF(蛋白酶抑制剂)200mgA112358Y-27632(ROCK1抑制剂)10mgA228648Ferrostatin-1(铁死亡抑制剂)50mgA379804Capsaicin(TRPV1激动剂)100mgA459882IBMX(PDE抑制剂)100mgA181909MG-132(蛋白酶抑制剂)5mgA695566Prostaglandin E2(PGE2受体激活剂)50mgA697005Carperitide(内皮素受体抑制剂)5mg
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