桃李不言之RFect siRNA转染试剂

   在生物科技的研发浪潮中，每一次技术的革新都可能为疾病的治疗和生命科学的探索带来革命性的突破。在众多的生物技术中，RNA干扰（RNAi）技术因其在基因功能研究和潜在的临床应用中的巨大价值而备受关注。而实现RNAi技术的关键步骤之一，就是高效、安全的siRNA转染。在这个领域，RFect siRNA转染试剂的诞生，无疑是给小核酸递送研究领域注入了一股新鲜的活力。

   故事要从2013年说起。那一年，一群满怀激情的海归科学家，带着在海外积累的丰富经验和对科研的无限热忱，回到了祖国的怀抱。那时，国内的生物试剂行业还未兴盛，在小核酸转染试剂领域更是无人问津。市面上出现的小核酸转染试剂都为进口品牌，如赛默飞的lipofectamine2000、Sigma的PEI等，在当时确实给国内的RNAi研究带来了非常大的助益。但这些进口转染试剂的成分普遍为阳离子脂质体或聚乙烯亚胺（PEI），而这两种成分对细胞都会造成不同程度的毒性。

   聚乙烯亚胺属于阳离子聚合物的一种，具有良好的亲水性和极高密度的正电荷，作用机制是通过把DNA包裹形成复合物，然后附着在细胞膜上被内吞进入胞内进而发挥作用的，但这种强电荷聚合物和生物大分子较为亲和，因而最初其实是专为质粒转染而研发的，对小分子siRNA转染来说并不专业；并且由于聚乙烯亚胺是不可降解的，因此对细胞的毒性也是不可忽略的。阳离子脂质体和PEI的作用原理相似，通过带负电的核酸结合到带正电的脂质体上，形成核酸-阳离子脂质体复合物，最终吸附到带负电的细胞膜表面，通过内吞导入细胞内。两者最大的区别是阳离子脂质体在分子结构上除了具有一个阳离子极性的头部外还含有一个疏水的尾巴，因此转入细胞后不容易降解，会损伤细胞器，同样容易造成细胞死亡。

   百代生物海归团队在意识到这两种成分的转染试剂细胞毒性比较大这一问题后，决心要利用自身所学来改变这一现状，同样也为了能够填补小核酸转染试剂在国内生物试剂行业的空白。他们知道，要想在这一领域取得突破，就必须研发出一种既高效又安全的siRNA转染试剂，以满足日益增长的科研需求。

   考虑到从分子结构上阳离子脂质体更适合小分子核酸的转染，研发团队便将研发重心聚焦于阳离子脂质体的结构改建上。但是，如何改建才能提高阳离子脂质体的递送效率，如何改建才能降低其细胞毒性，如何将这二种性能的改善完美地映射于改建的分子结构，国际上并无成法可效。为了攻克这一难题，团队成员沉下心来，仔细查阅了300多篇阳离子脂质体结构和性能的学术论文，再反复研讨比对，先后提出了20多条分子改建和修饰的思路，再一一实验验证。让人大失所望的是，这些思路最后都被证伪，无一可行。一年多的辛苦付出毫无成果，创业团队非常失望，几乎失去了继续创业的信心。在这艰难时刻，团队中的夏国庆博士借鉴抗体的结构特性，提出了一个全新的思路----在阳离子脂质体的头部和疏水的尾部之间加入一个易被改变的“可变区”，这个“可变区”在从细胞外进入到细胞内以后，就会被降解掉，从而使整个分子分解成一个头部和尾部。由于疏水的尾部一般由长链脂肪酸构成，细胞膜也是脂质构成的，所以分解后就可以直接参与到细胞膜的脂质代谢中，而阳离子的头部就会释放出siRNA，从而参与RNA的干扰过程，这样，不仅极大地提高了siRNA的敲降效率，而且还能有效降低对细胞的毒性损害。

   有了这样的研发思路以后，大家的研究豁然开朗，在数月不知疲倦的钻研与摸索后，最终促成了RFect siRNA转染试剂的诞生。然而研发出以后并不意味着成功，研发团队还需对转染试剂进行一系列的质量检验和性能测试。团队将市面上最具代表性的两款转染试剂lipofectamine2000和PEI，在保持细胞类型、细胞代数等其他实验条件一致的情况下，严格按照不同产品的说明书，与RFect一同进行了平行对比试验。实验结果令博士们大为惊喜，RFect对siRNA的转染性能完全超越了lipofectamine2000和PEI的转染效率，尤其是在一些难转的免疫悬浮细胞、原代细胞中的转染：如RFect对于RAW264.7的转染效率可达80%，而lipofectamine2000仅获得了30%的转染效率，PEI更是寥寥无几，只有5%左右；在原代肝细胞的siRNA转染中，仅RFect可实现对原代细胞的有效转染，转染后原代肝细胞的死亡率和空白对照组的细胞死亡率几乎相同，而lipofectamine2000和PEI皆因毒性大而引起细胞死亡严重。有了这样的结果，研发团队的研究显然已成功了一半，并且这项小核酸递送技术在当时是独家的，这就意味着国内终于也有了能抗衡国外大牌转染试剂的创新型产品，百代生物也成为了国内小核酸递送技术领域的首批开拓者！

   然而在创业期间，尽管有了不错的产品，但在如何销售出去的问题上面大家又再次陷入了低谷。由于品牌太年轻，在市场上，和一众国际生物试剂巨头相比，消费者很难对一款国产试剂的实力产生信任，这一点也是诸多国产试剂所面临的痛点。就在这萎靡之际，一位老教授的来电打开了这一僵局，这让研发团队又重新燃起了希望。教授讲述了他的siRNA转染实验经历，言辞话语中可以看出这是一位转染经验十分丰富的专家。教授表示近期用过多款siRNA转染试剂进行原代内皮细胞的转染，但结果都不理想，哪怕用赛默飞lipofectamine 2000转染效果也不行，由于原代内皮细胞很脆弱，非常容易死亡，尽管教授课题组做了很多次调整，也无法解决该问题，非常受挫。要知道，siRNA转染的目的是沉默目的基因的mRNA表达水平，而转染试剂毒性引发的细胞死亡会使得细胞自身mRNA降解，从而在沉默效率检测中也表现为目的基因mRNA水平的下降，这对实验结果的准确性造成了非常大的影响。教授经过多方打听找到了百代生物，听说RFect siRNA转染试剂毒性低，非常希望能够买来试一试。就这样，RFect小核酸转染试剂迎来了它的第一个机遇，同样这也是第一个挑战。

  在试剂寄出后的每一天，研发团队一直处于焦急的等待中。教授所研究的原代内皮细胞，细胞膜通透性不高并且对转染试剂极为敏感，尽管RFect在原代肝脏细胞上取得了非常好的转染效果，但能否挑战成功原代内皮细胞的转染仍然是个问号。

   一周后，电话那头传来了老教授激动的声音：“成功了！转的非常好！”还在实验室闷头试验的研发团队听到这个消息后瞬间沸腾了，多少日夜换来的心血成果终在此刻得到了最宝贵的认可！RFect siRNA转染试剂的成功，不仅仅是对研发团队辛勤工作的肯定，更是对国产生物试剂实力的一次有力证明。这个消息很快在科研圈内传开，许多曾经对国产试剂持怀疑态度的研究人员也开始对RFect siRNA转染试剂投来关注的目光。

   随着时间的推移，RFect siRNA转染试剂的口碑逐渐建立起来。越来越多的实验室开始尝试使用这款国产转染试剂，并且反馈回来的结果都非常积极。RFect siRNA转染试剂不仅在转染效率上表现出色，更重要的是，它在减少细胞毒性方面的优势，使得许多以往难以转染的细胞类型也能够轻松实现高效转染。

   百代生物的研发团队并没有因为初步的成功而满足，他们继续深入研究，不断优化RFect siRNA转染试剂的配方和工艺，力求为科研工作者提供更加稳定、高效、安全的转染解决方案。同时，他们也在积极拓展产品线，开发出针对不同细胞类型和实验需求的转染试剂，以满足更广泛的市场需求。

   在科研领域，每一次小小的进步都可能带来巨大的变革。RFect siRNA转染试剂的成功，不仅推动了国内生物试剂行业的发展，也为广大科研工作者提供了更多的选择和可能性。它的故事，就像一颗种子，被播撒在科研的土壤中，随着时间的推移，逐渐生根发芽，开出了希望的花朵。而这一切，都始于百代生物海归团队的那个决定——不满足于现状，勇于创新，追求卓越。他们的努力和坚持，最终开花结果，为科研事业贡献了自己的力量。这不仅是一个产品的故事，更是一段科研探索和创新精神的传奇。