如何获得高质量RNA

Q：师姐，为什么每次你提取RNA，总是提的很好？

A：哈哈哈，我有秘方。

Q：的确RNA提取不如DNA那么容易，那是因为RAN容易被降解。主要存在以下难点：

样品处理不彻底：样品可能未完全溶解，导致RNA得率低。

RNA污染：操作过程中可能存在RNase污染，这会降解RNA。

样本不新鲜：使用不新鲜的样本可能导致RNA质量下降。

样本起始量不当：样本量太少可能导致RNA得率低，而样本量太多则可能导致裂解不充分。

RNA洗脱不充分。

那么如何解决这些难点呢？小新整了一些实验技巧

1、杜绝外源RNA酶的污染

（1）操作环境干净无灰尘，严格戴好口罩，手套，避免空气流通；

（2）实验所涉及离心管和枪头最好用DEPC处理过，移液器和实验台面等要用75%的酒精擦拭；

（3）实验所涉及的试剂/溶液，尤其是水，必须确保RNase-Free。

2、阻止内源RNA酶的活性

（1）保证样本新鲜，如果样本不能及时处理，可做如下处理：

对于组织样本取材后应立即置于液氮中速冻或加入RNase抑制剂中保存，然后可以移至-80℃冰箱保存，避免反复冻融；

对于血液样本，可将新鲜血液进行红细胞裂解，得到白细胞，然后加入一定量的Trizol试剂，可在-70℃保存较长时间；

对于培养细胞，去除培养基，可在-70℃保存较长时间。

（2）在加入裂解液前，保持低温操作，所用碾磨器具也必须提前预冷，防治RNA被酶降解；

（3）控制好样品的起始量。如果样品太大无法迅速和裂解液接触，没有接触到的样本很快就会被内源酶降解；

对于RNA提取，新百基生物拥有多年经验，研发生产的RNA提取试剂盒，不仅应用广泛，可从植物组织，动物组织，细胞等样本中获取RNA，RNA片段完整性良好而且不含有毒有害化学物质。在保证RNA产物质量的同时，坚持科学环保。