抗生素的配制

1氨苄霉素(100mg/ml)

常用的为氨苄青霉素钠,为抗革兰氏阳性及阴性菌,属青霉素衍生物,能使细菌细胞膜的内层转肽酶失活从而抑制细菌细胞壁的合成,可用于分子生物学和组织培养(防止微生物污染和抗性筛选)。配制量50m的100mg/ml母液,使用时按1:1000加入(常规配制浓度为50mg/ml,实验中非常容易出现卫星菌落)。

配制方法:称取5g Ampicillin置于50ml塑料离心管中。加入40ml灭菌去离子水,充分混合溶解之后定容至50ml。 0.22 u m滤膜过滤除菌,小份分装( 1ml/管)后,置于-20℃保存,使用时按1:1000加入。

2卡那霉素(50mg/ml)

硫酸卡那霉素(Kanamycin sulfate)是一种氨基糖苷类抗生素,对革兰氏阳性菌和阴性菌及支原体都有抑制作用,作用机制在于靶向结合细菌30S核糖体亚基,从而抑制核糖体易位和引起错误编码进一步干扰蛋白质合成。卡那霉素的工作浓度,一般为50ug/ml,一般配制为50mg/ml的储存母液,0.22um滤膜过滤除菌,使用时按1:1000加入。

配制方法:溶解2.5g卡那霉素于足量的灭菌去离子水中,最后定容至50ml。分装成小份(1ml/管)于-20℃贮存。母液过滤除菌后2-8℃保存,-20℃可长期保存,37℃可保存5天。

3壮观霉素(50mg/mL)

壮观霉素(spectinomycin)(100mg/ml) pSET2,pSET4s,壮观霉素又称为奇霉素。壮观霉素属于氨基糖苷的抗菌素。与链霉素不同,它不会发生mRNA的误读,但能与细菌的30S核蛋白体结合而阻碍蛋白质的生物合成。

配制方法:用灭菌后的去离子水配成50mg/mL的储备液,0.22um滤膜过滤除菌,使用时按1:1000加入。

4氯霉素(25mg/ml

氯霉素是通过抑制细菌蛋白合成而作用的。它与细菌70S核糖体上50S亚单位可逆性结合,从而阻止氨酰tRNA的氨酸末端与核糖体上的受体结合。这样氨酸底物就不能与转肽酶相互作用,也就不能形成肽键。氯霉素对革兰氏阴性细菌、革兰氏阳性细菌等都有抑制作用。

配制方法:溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中,最后定容至10ml,用过滤器过滤灭菌,使用时按1:1000加入。分装成小份(1ml/管)于-20℃贮存。

5链霉素(streptomycin)(50mg/ml)

硫酸链霉素为一种氨基糖苷类抗生素。链霉素主要与细菌核糖体30S亚单位结合,抑制细菌蛋白质的合成。

配置方法:溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中,最后定容至10ml,用过滤器过滤灭菌,使用时按1:1000加入。分装成小份(1ml/管)于-20℃贮存。

6四环素(tetracyyline)(10mg/ml)

四环素的作用机制在于药物能特异性地与细菌核糖体30S亚基的A位置结合,阻止氨基酰-tRNA在该位上的联结,从而抑制肽链的增长和影响细菌蛋白质的合成。

配制方法:溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中,或者将无碱的四环素溶于无水乙醇,定容至10ml,用0.22微米滤膜过滤除菌,-20℃冻存。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光,于-20℃贮存,使用时按1:1000加入。

的终浓度添加于生长培养基。

7羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)

羧苄青霉素也叫羧苄西林,属于青霉素类的抗菌药物,属于广谱青霉素类的抗生素,主要是具有抗菌的功效,通过抑制细菌细胞壁合成发挥杀菌作用,对大肠埃希菌、变形杆菌属以及肠杆菌属、枸橼酸菌属、沙门菌、志贺菌等肠杆菌科都具有一定的抗菌作用。

配制方法溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份(1ml/管)于-20℃贮存,使用时按1:1000加入。

备注:氨苄青霉素,使用建议采购钠盐试剂,方便快速溶解。不带盐离子的,很难水中溶解。

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作者:倾城
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来源:TechFM
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