基因表达芯片(Microarray)和RNA-seq的区别

基因表达芯片(Microarray)和RNA-seq都是用于分析基因表达的技术,但它们的原理、数据格式和输出结果有所不同。

1. 基因表达芯片(Microarray)数据格式

基因表达芯片技术通过预先设计好的探针(通常是已知基因的DNA序列)与样本中的RNA或cDNA进行杂交,从而检测基因的表达水平。在输出格式上,基因表达芯片通常以表格形式呈现数据。

格式特点:

① 行代表不同的基因或探针。

② 列代表不同的样本或实验条件。

③ 每个单元格包含一个特定基因在相应样本中的表达水平(例如,强度值或信号强度)。

数据示例:

假设你有三个样本(A、B、C),并且在基因表达芯片上检测了五个基因(Gene1, Gene2, Gene3, Gene4, Gene5),一个典型的基因表达芯片数据表可能如图

在这个示例中,表中的每个数字代表特定基因在不同样本中的表达强度。通常,这些数值会经过背景校正和标准化处理。

格式类型:

常见文件格式:*.CEL(原始数据文件)、*.txt、*.csv(标准化后的数据文件)。

2. RNA-seq数据格式

RNA-seq(RNA测序)是一种基于高通量测序技术的基因表达分析方法,它通过测序获得样本中所有转录本的序列信息,然后计算每个基因的表达水平。RNA-seq的输出格式通常为基因表达量的计数数据或转录本的定量数据。

格式特点:

① 数据格式包含基因的ID和它在每个样本中的表达量。

② 原始输出格式通常是FASTQ文件或BAM文件,其中包含基因的序列信息和位置信息。

③ 定量数据通常以读取计数(read counts)或FPKM(Fragments Per Kilobase per Million)、**TPM(Transcripts Per Million)**等单位表示。

数据示例:

假设你有三个样本(A、B、C),并且检测了五个基因(Gene1, Gene2, Gene3, Gene4, Gene5)。RNA-seq数据输出格式通常以计数矩阵或表达量表格的形式呈现,类似于图示

这个表格中的每个单元格表示的是该基因在不同样本中的读取计数,通常在分析前会进行标准化,消除样本之间的测序深度差异。

格式类型:

原始数据:*.fastq(包含原始的序列数据)、*.bam(比对后的数据)。

定量结果:*.txt、*.csv、*.tsv(基因表达量的计数矩阵)。

常见的定量表达格式:count matrix,包括基因ID和每个样本的计数。

FPKM和TPM等标准化表达量数据也可以在输出中查看。

RNA-seq特有的表达量示例(TPM、FPKM):

这里的**TPM(每百万转录本数)或FPKM(每千碱基对每百万读取数)**是RNA-seq分析中常用的表达量单位,表示每个基因的相对表达水平。


总结:两者的主要区别


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作者:玉兰
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