猪免疫球蛋白 G(IgG)试剂盒(ELISA)使用指南

在生物学研究与猪相关疾病的检测中,猪免疫球蛋白 G(IgG)的定量检测至关重要。猪免疫球蛋白 G(IgG)试剂盒(ELISA)为此提供了精准的检测方案。

实验原理

试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预包被抗猪 IgG 抗体(固相抗体)的微孔酶标板中加入校准品和待测样本,再加入 HRP 标记的抗猪 IgG 抗体(酶标抗体)。温育和充分洗涤后,形成固相抗体 - 抗原 - 酶标抗体的夹心复合物。加入底物 A 和 B,在 HRP 催化下产生蓝色产物,经终止液(2M 硫酸)作用转化为黄色。通过酶标仪在 450nm 波长测定吸光度(OD 值),其与待测样品中猪 IgG 浓度正相关,进而拟合校准品曲线,计算样本中猪 IgG 浓度。

试剂盒限制性

  1. 仅供科研使用,严禁用于临床诊断。
  2. 必须在试剂盒标示的有效期内使用,过期产品不可使用。
  3. 不能与其他厂家的试剂盒或者组分混用。
  4. 需使用试剂盒配套的样品稀释液。
  5. 若样本值高于最高标准品浓度值,应将样本适当稀释后重新测定。
  6. 待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果,检测前需排除该因素。
  7. 通过其他方法得到的检测结果,与本试剂盒测定结果不具有直接可比性。

            技术提示

            1、混合蛋白溶液时,避免起泡。

            2、加校准品与样本时,每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头,公共组分应该悬臂加样,避免交叉污染。

            3、合适的温育时间,和充分的洗涤步骤,是保证实验结果准确性的必要条件。

            4、使用自动洗板机时,加入一个 30 秒浸泡的步骤,可以提高检测精度。

            5、底物溶液为无色液体,保存过程中变为蓝色,代表底物溶液已经失效,不得使用。

            6、终止液加样顺序与底物溶液加样顺序一致,加入终止液后,蓝色底物产物,会瞬间变为黄色。

            7、实验中,用剩的板条,应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

            8、所有液体组分,使用前充分摇匀,严格按照说明书标明的时间、加样量及加样顺序进行温育操作。

版权声明:
作者:zhangchen
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来源:TechFM
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