为您提供3D细胞培养全方位服务-基质胶常见问题解答

随着科学研究的不断深入，3D细胞培养的优势日益突出，越来越多的科研工作者将3D细胞培养系统应用于肿瘤生长、药物研发、组织修复/再生以及疾病模型等。与体内系统相比，3D细胞培养系统在时间和成本上更具有优势，且更加有望于转化到临床。

然而，寻找到合适的基质胶产品并正确使用是推进研究的第一步！

特此我们为您收集整理了有关基质胶产品的问题，并为您作出解答~

如此多版本的基质胶该如何选择？

一、含酚红or不含酚红

1、含酚红基质胶:

酚红可作为pH指示剂，被稀释于大体积后产品自身的指示作用强度降低；酚红具有类似雌激素效果，在对激素敏感的研究中不建议使用。

2、不含酚红基质胶:

无颜色干扰，更适用于需染色分析的相关应用：如用荧光染料检测内皮血管生成；培养类器官时尽量使用无酚红基质胶。

二、标准浓度or高浓度

1、标准浓度:

适用于2D和3D细胞培养，如细胞侵袭/迁移实验，或用于帮助细胞贴壁。

2、高浓度:

常用于体内成瘤实验，可使皮下注射肿瘤细胞固定在原处，形成局部的环境更利于肿瘤的生长不易被小鼠的免疫系统清除；也适用于血管生成实验。需要注意的是，基质胶终浓度需要达到10mg/mL以上，以促进细胞的附着、分裂和迁移。

三、低因子or标准型

低因子基质胶常用于在类器官培养等需要精准分化控制细胞培养场景。

基质胶中的细胞因子易引起细胞的不定向分化，甚至凋亡。低因子基质胶是在标准型基质胶基础上进行了减生长因子处理，低因子基质胶中痕量IGF-1、VEGF、TGF-β、 EGF、 bFGF等生长因子的含量均少于标准型基质胶。

四、基质胶有什么作用呢？

在基质胶的支撑下，细胞可维持3维结构生长，成为一个个三维结构的细胞团。此时基质胶会发挥体内基底膜基质的作用，代替体内细胞基质促进细胞生长。加大细胞之间的联系，细胞与细胞之间存在相互作用。同时，营养物质或者药物渗透三维细胞团时将受到外围基质胶和细胞阻力形成浓度和渗透梯度。并且它还能模拟体内微环境，诱导细胞的分化和极化。

五、实验前需要提前多久解冻基质胶？

A: 以标准型基质胶为例，对于全新未拆封产品，冷冻状态下基质胶可在使用前一天埋于冰中转移至2-8℃环境，次日使用；或者在操作前4h暴露于4℃环境解冻，立刻使用；对于已经封装好的基质胶（500 μL为例），冷冻基质胶在使用前30min于4℃环境下解冻即可使用。

六、基质胶最低凝胶限度？

建议使用时稀释浓度不低于4mg/mL，并保证基质胶完全溶解于稀释体系中。

七、基质胶铺板时如何判断基质胶是否已经凝固并可进行下一步操作？

标准型浓度的基质胶（8-13mg/mL）的凝胶时间约为20-30 分钟，而高浓度型基质胶（16-26mg/mL）凝胶时间约为3分钟，37℃环境孵育并确保凝胶时间充足的条件下，可观察到基质胶在底层形成薄层凝胶，即可判断基质胶已经凝固。

八、进行一次侵袭实验需要准备多少基质胶呢？

对于24孔板的Transwell小室，建议使用将标准浓度进行1:8稀释后，以60 μL稀释液进行铺胶；我们对于标准型基质胶Matrigengel Matrix (Cat.No. 082704)和Matrigengel Matrix (Phenol Red Free)  (Cat.No. 082706)都进行了侵袭验证，同时提供了不同稀释比例（1:6和1:4）的肿瘤细胞侵袭效果，可作为实验参考。

经验证，以不同浓度标准型基质胶(Cat. No. 082704)作用24h后，检测到5×104 SGC-7901的侵袭，且随着基质胶浓度的增 加，成功侵袭的细胞数明显减少。

经验证，以不同浓度标准型无酚红基质胶(Cat.No. 082706)作用24h后，检测到5×104 SGC-7901的侵袭，且随着基质胶浓度的增加，成功侵袭的细胞数明显减少。

九、基质胶能够诱导ES/iPSC细胞分化吗？

诱导分化不取决于基质胶，这是由培养基定向分化完成的。Matrigengel Matrix IPSC Level(Cat.No. 082777)可以维持干细胞培养，并保持干性，有利于后续定向分化。

十、类器官长得越大越好吗？

不是的，类器官培养过程中需要观察生长尺寸，并通过传代等方式控制。由于类器官内部缺乏循环系统，当类器官尺寸较大时，靠近中心的细胞难以和外界进行氧气和营养成分的交换，容易引起凋亡，不利于后续检测。

十一、体内成瘤推荐哪一款基质胶？

推荐使用Matrigengel Matrix (HC)(Cat. No. 082724), 经体内成瘤实验验证,能显著促进裸鼠皮下肿瘤增殖。

经体内成瘤实验验证，与对照组和C公司同类产品相比，不同批次的高浓度基质胶(Cat. No.082724)能显著促进裸鼠皮下肿瘤增殖。